Relatórios
As células da linhagem Caco-2, (linhagem de células de adenocarcinoma de cólon humano) quando cultivadas em condições específicas, formam uma monocamada confluente composta por células com características morfológicas e funcionais semelhantes às dos enterócitos humanos. Essas células são cultivadas em placas de cultura especiais para a montagem de um sistema útil para o estudo da permeabilidade e transporte intestinal de compostos.
Esse modelo é um dos mais utilizados para a predição de permeabilidade intestinal em humanos, principalmente pelo fato de as células Caco-2 expressarem transportadores que têm afinidade por substratos e atividade similares àquelas in vivo. Sendo assim, este modelo foi empregado para o estudo de permeabilidade do Item de Teste fosfoetanolamina (ST-024.8) e para a determinação de sua Permeabilidade aparente (Papp), parâmetro utilizado para estimar a permeabilidade intestinal de compostos in vivo.
A quantificação da fosfoetanolamina foi feita através de cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas (LC-MS), juntamente com a validação parcial de um método analítico, o qual foi previamente validado para a quantificação do Item de Teste 024.8 em plasma de ratos (estudo 021-DVM-020-15).
Os parâmetros obtidos apresentaram-se de acordo com o recomendado para a validação de métodos analíticos. Nesse estudo de permeabilidade, a proporção do Item de Teste ST-024.8 que permeou a monocamada de células Caco-2 foi inferior ao limite de detecção estabelecido para o método analítico utilizado. Sendo assim, isso qualifica o Item de Teste 024.8 como um composto de baixa permeabilidade, visto que a Papp foi classificada como < 2 x 10-6 cm/s. Os dados obtidos in vitro sugerem que a fosfoetanolamina apresenta baixa permeabilidade intestinal, levando, consequentemente, a uma baixa absorção oral in vivo.
Avaliação da permeabilidade intestinal in vitro da fosfoetanolamina em células caco-2
Os canais de potássio dependes de voltagem do tipo hERG (human ether-a-go-gorelated) são essenciais para a atividade elétrica normal no coração. A disfunção do canal hERG pode causar síndrome do QT longo (SQTL), caracterizada por retardo na repolarização e prolongamento do intervalo QT do potencial de ação da célula cardíaca, o que aumenta o risco de arritmias ventriculares e de morte súbita. Assim, compostos que atuem nesse canal e que possivelmente causem síndrome do QT longo têm sido eliminados precocimente no processo de desenvolvimento não clínico em testes de segurança (Sanguinetti & TistaniFirouzi, 2006). O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da fosfoetanolamina (ST-024) sobre o canal hERG in vitro, utilizando a linhagem de células HEK-293 transfectadas com o canal hERG humano. Para isso, foram utilizadas as concentrações de 0,1 - 10 μM da fosfoetanolamina, enquanto que o controle positivo dofetilide, um potente e seletivo inibidor do canal hERG, foi incubado nas concentrações de 0,003 - 3 μM. Ambos os compostos foram mantidos por 30 minutos em contato com as células.
Os resultados obtidos neste estudo demostram que a fosfoetanolamina não inibiu o canal hERG, nas concentrações avaliadas, diferente do dofetilide, o qual apresentou inibição proporcional a concentração usada com uma CI50 de 0,012 (0,0027 - 0,0515) μM. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que a fosfoetanolamina (ST-024), até a concentração de 10 μM, não inibe os canais de hERG.
Os canais de potássio dependes de voltagem do tipo hERG (human ether-a-go-gorelated) são essenciais para a atividade elétrica normal no coração. A disfunção do canal hERG pode causar síndrome do QT longo (SQTL), caracterizada por retardo na repolarização e prolongamento do intervalo QT do potencial de ação da célula cardíaca, o que aumenta o risco de arritmias ventriculares e de morte súbita. Assim, compostos que atuem nesse canal e que possivelmente causem síndrome do QT longo têm sido eliminados precocemente no processo de desenvolvimento não clínico em testes de segurança (Sanguinetti & TistaniFirouzi, 2006).
O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da fosfoetanolamina (ST-024) sobre o canal hERG in vitro, utilizando a linhagem de células HEK-293 transfectadas com o canal hERG humano. Para isso, foram utilizadas as concentrações de 0,1 â-10 μM da fosfoetanolamina, enquanto que o controle positivo dofetilide, um potente e seletivo inibidor do canal hERG, foi incubado nas concentrações de 0,003 â- 3 μM. Ambos os compostos foram mantidos por 30 minutos em contato com as células. Os resultados obtidos neste estudo demostram que a fosfoetanolamina não inibiu o canal hERG, nas concentrações avaliadas, diferente do dofetilide, o qual apresentou inibição proporcional a concentração usada com uma CI50 de 0,012 (0,0027 - 0,0515) μM.
Com base nos resultados obtidos, conclui-se que a fosfoetanolamina (ST-024), até a concentração de 10 μM, não inibe os canais de hERG.
Relatórios
Com o objetivo de dar transparência aos estudos financiados pelo MCTI para esclarecer a segurança e eficácia da fosfoetanolamina, serão disponibilizados os relatórios produzidos pelos laboratórios participantes.
Assim, nesta seção poderão ser acessados os relatórios relativos à caracterização da molécula e síntese química, aos ensaios pré-clínicos e, caso se demonstre a segurança da fosfoetanolamina, os ensaios clínicos de Fase I.
Relatório do GT Fosfoetanolamina de dezembro/2015.
O Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação e o Ministério da Saúde de forma articulada e que contou com a participação dos integrantes do Grupo de Trabalho, produziram o primeiro relatório de atividades, resultado de cinco reuniões realizadas em Brasília nos meses de novembro e dezembro de 2015; assim este relatório contempla o histórico do composto fosfoetanolamina, os antecedentes da criação do Grupo de Trabalho da Fosfoetanolamina, a mobilização e participação de infraestruturas capacitadas para desenvolver pesquisas em conformidade com a legislação vigente e por fim trata de questões relativas a segurança e eficácia.
22/12/2015 - Relatório de Atividades do Grupo de Trabalho sobre a Fosfoetanolamina
Relatórios (resumo executivo e relatório completo) sobre os componentes químicos das amostras de fosfoetanolamina produzida pelo Instituto de Química de São Carlos da Universidade de São Paulo.
Estes relatórios descrevem os resultados dos estudos realizados pelo Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia de Fármacos e Medicamentos (INCT-INOFAR), no Laboratório de Química Orgânica Sintética (LQOS) do Instituto de Química da Universidade Estadual de Campinas-UNICAMP, em colaboração com o Laboratório de Avaliação e Síntese de Substâncias Bioativas (LASSBio), do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade Federal do Rio de Janeiro-UFRJ, sobre os componentes químicos das cápsulas de fosfoetanolamina (FOS) oriundas do Instituto de Química de São Carlos da Universidade de São Paulo.
Avaliação do Potencial Citotóxico in vitro da Fosfoetanolamina Sintética (FS) e da Fosfoetanolamina Sintética Nanoencapsulada (FSNE).
Este laudo técnico teve por objetivo verificar o potencial antiproliferativo in vitro da Fosfoetanolamina Sintética (FS) e da Fosfoetanolamina Sintética Nanoencapsulada (FSNE) frente a três linhagens de células tumorais e duas linhagens de células não tumorais, além de verificar o potencial hemolítico destes compostos.
Avaliação da Atividade Citotóxica e Antiproliferativa da Fosfoetanolamina, Monoetanolamina e Fosfobisetanolamina em Células Humanas de Carcinoma de Pâncreas e Melanoma.
O presente estudo avaliou a atividade citotóxica e antiproliferativa dos principais compostos presentes nas análises químicas da amostra fosfoetanolamina produzida pelo Sr. Salvador Claro Neto (Fosfoetanolamina, Monoetanolamina e Fosfobisetanolamina), sobre células humanas de carcinoma de Pâncreas e Melanoma in vitro. Visando fornecer maior robustez aos resultados gerados, foram empregadas três diferentes metodologias para avaliar a possível ação antitumoral com cada uma das substâncias mencionadas acima
Relatórios (resumo executivo e relatório completo) do Estudo de Toxicidade Oral de Dose Máxima e Doses Repetidas por 7 dias da Fosfoetanolamina Sintética (USP - São Carlos) em ratos.
Avaliar a DOSE MÁXIMA TOLERADA da fosfoetanolamina (sintetizada pelo grupo de Quimica da USP-São Carlos) em roedores. O teste da dose máxima tolerada ou MTD, (do inglês Maximum Tolerated Dose), bem como o escalonamento de doses, é um teste comumente utilizado para seleção das doses a serem utilizadas nos estudos regulados de toxicologia subsequentes com duração de até 30 dias. É um teste exploratório e utiliza um número reduzido de animais. Esse protocolo é uma parte importante da toxicologia, pois identifica qual a dose máxima capaz de evidenciar os sinais de toxicidade, sendo relevante para a condução dos estudos subsequentes de toxicidade, que empregam um número maior de animais (NC3Rs LASA, 2009). É normalmente avaliada através de parâmetros como sinais clínicos, alteração de peso corporal, consumo de comida, morbidade e mortalidade
Relatórios (resumo executivo e relatório completo) de Avaliação da Genotoxicidade da Fosfoetanolamina (USP – São Carlos): Teste de Mutação Reversa em Salmonella typhimurium (Teste AMES – ENSAIO Salmonella/ MICROSSOMA).
Estes estudos objetivaram detectar mutações de ponto, induzidas pela substância teste (fosfoetanolamina – USP, São Carlos), através da avaliação da reversão de mutações em diferentes cepas de Salmonella typhimurium. As mutações de ponto envolvem substituição, adição ou deleção de um ou alguns pares de bases de DNA.
Relatórios (resumo executivo e relatório completo) de Avaliação da Genotoxicidade da Fosfoetanolamina (USP – São Carlos): Teste de Micronúcleos em Medula Óssea de Camundongos.
Avaliar se a fosfoetanolamina (sintetizada na USP- São Carlos) induz alterações cromossomais estruturais e/ou numéricas, em cromossomos ou no aparelho mitótico de eritroblastos, através da análise de eritrócitos da medula óssea de camundongos.
Relatório Completo da Avaliação do Potencial Citotóxico e Hemolítico in vitro da Fosfoetanolamina Sintética (FS).
Estudo realizado com o objetivo de verificar o potencial antiproliferativo in vitro da Fosfoetanolamina Sintética (FS) frente a três linhagens de células tumorais e duas linhagens de células não tumorais, além de verificar o potencial hemolítico deste composto.
Relatório Completo da Avaliação Atividade Anticâncer da Fosfoetanolamina Sintética no Carcinossarcoma 256 de Walker.
Este laudo técnico teve por objetivo avaliar a possível atividade anticâncer da Fosfoetanolamina Sintética no Carcinossarcoma 256 de Walker.
Relatório Completo da Avaliação da Atividade Anticâncer da Fosfoetanolamina Sintética (FS) no Sarcoma 180.
O presente estudo teve como objetivo avaliar a possível atividade anticâncer da Fosfoetanolamina Sintética (FS) no Sarcoma 180.
Avaliação da Atividade Antitumoral da Fosfoetanolamina Sintética (USP – São Carlos) em Modelo de Tumor Xenográfico de Melanoma Humano em Camundongos.
Este estudo teve os seguintes objetivos: (1) avaliar o efeito da Fosfoetanolamina Sintética (USP – São Carlos) administrada por via oral durante 24 dias sobre o peso corporal e a progressão tumoral de melanoma humano, utilizando o modelo de tumor xenográfico subcutâneo, em camundongos nude; e, (2) avaliar o efeito da Fosfoetanolamina Sintética (USP – São Carlos) administrada por via oral durante 24 dias, sobre a morbidade, mortalidade e formação de úlceras tumorais, no modelo de tumor xenográfico subcutâneo, em camundongos nude.
Relatório do Seminário sobre estudos preliminares da Fosfoetanolamina Sintética (FOS).
Este relatório apresenta a síntese das discussões do Seminário sobre os estudos preliminares da Fosfoetanolamina Sintética (FOS) que ocorreu no Instituto Nacional de Câncer em 17 de maio de 2016.
Relatório do Seminário sobre estudos preliminares da Fosfoetanolamina Sintética (FOS)
Avaliação das Atividades Citotóxica e Antiproliferativa da Fosfoetanolamina (Unicamp), Monoetanolamina (Unicamp) e Fosfobisetanolamina (Unicamp) em Linhagens de Células Humanas de Carcinoma de Pulmão, Carcinoma de Pâncreas e Melanoma.
O presente estudo avaliou a atividade citotóxica e antiproliferativa das Substâncias Teste: Fosfoetanolamina, Fosfobisetanolamina e Monoetanolamina, sintetizadas pelo Instituto de Química da Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), em linhagens de células humanas de carcinoma de pulmão, carcinoma de pâncreas e de melanoma.
Relatório Completo do Estudo de toxicidade de Doses Repetidas de 28 dias (USP São Carlos) em ratos.
O presente estudo teve como objetivo avaliar a toxidade da Substância Teste Fosfoetanolamina Sintética (USP – São Carlos), através da administração repetida em roedores. Ratosmachos e fêmeas foram tratados com Veículo (Salina) ou com diferentes doses da Fosfoetanolamina Sintética (USP – São Carlos) (100 mg/kg, 500 mg/kg ou 1.000 mg/kg), pela via oral, uma vez ao dia durante 28 dias.
Relatório completo da avaliação do efeito antitumoral da fosfoetanolamina sintética no modelo experimental de melanoma murino (NPDM – UFC).
O presente estudo teve como objetivo investigar o potencial antitumoral da Fosfoetanolamina Sintética (FS), administrada por via oral, em camundongos C57BL/6 inoculados com melanoma B16F10.
Desenvolvimento de metodologia analítica para determinação da fosfoetanolamina sintética produzida pela USP - São Carlos e a fosfoetanolamina padrão sigma em plasma de rato.
O presente estudo teve como objetivo desenvolver e validar metodologia analítica para a quantificação da Substância Teste Fosfoetanolamina da USP (ST-021.3) em plasma de rato e aplicação nos estudos de farmacocinética.
Relatório completo da avaliação do perfil farmacocinético da fosfoetanolamina padrão sigma em plasma de rato.
O presente estudo teve como objetivo avaliar o perfil farmacocinético e biodisponibilidadeabsoluta da Fosfoetanolamina Sintética (USP – São Carlos) e da Fosfoetanolamina SIGMA, através da administração pela via oral e intravenosa em roedores. Ratos fêmeas foram tratados com a Fosfoetanolamina Sintética (USP – São Carlos) pela via intravenosa na dose de 20 mg/kg e pela via oral na dose de 1000 mg/kg.
AVALIAÇÃO DA POSSÍVEL ATIVIDADE ANTITUMORAL DA FOSFOETANOLAMINA (UNICAMP) EM MODELO DE TUMOR XENOGRÁFICO DE MELANOMA HUMANO EM CAMUNDONGOS.
O presente estudo teve os seguintes objetivos: (i) Avaliar a potencial atividade da Fosfoetanolamina (Unicamp) administrada por via oral durante 24 dias sobre o peso corporal e a progressão tumoral do melanoma humano, utilizando o modelo de tumor xenográfico subcutâneo em camundongos nude, e (ii) Avaliar o efeito da Fosfoetanolamina (Unicamp) administrada por via oral durante 24 dias, sobre a morbidade, mortalidade e formação de úlceras tumorais, no modelo de tumor xenográfico subcutâneo, em camundongos nude.
AVALIAÇÃO DA POSSÍVEL ATIVIDADE ANTITUMORAL DA MONOETANOLAMINA EM MODELO DE TUMOR XENOGRÁFICO DE MELANOMA HUMANO EM CAMUNDONGOS.
O presente estudo teve os seguintes objetivos: (i) Avaliar a potencial atividade da Monoetanolamina administrada por via oral durante 24 dias sobre o peso corporal e a progressão tumoral do melanoma humano, utilizando o modelo de tumor xenográfico subcutâneo, em camundongos nude, e (ii) Avaliar o efeito da Monoetanolamina administrada por via oral durante 24 dias, sobre a morbidade, mortalidade e formação de úlceras tumorais, no modelo de tumor xenográfico subcutâneo, em camundongos nude.
AVALIAÇÃO DA POSSÍVEL ATIVIDADE ANTITUMORAL DA MONOETANOLAMINA EM MODELO DE TUMOR XENOGRÁFICO DE MELANOMA HUMANO EM CAMUNDONGOS.
O presente estudo teve por objetivo investigar alguns dos mecanismos envolvidos na ação citotóxica da Monoetanolamina, que segundo a testes realizados pela Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) é um constituinte encontrado na proporção de 18,2 % nas cápsulas de fosfoetanolamina sintética produzida pela USP.
AVALIAÇÃO DA POSSÍVEL ATIVIDADE ANTITUMORAL DA MONOETANOLAMINA EM MODELO DE TUMOR XENOGRÁFICO DE MELANOMA HUMANO EM CAMUNDONGOS
O presente estudo teve os seguintes objetivos: (i) Avaliar a potencial atividade da Monoetanolamina administrada por via oral durante 24 dias sobre o peso corporal e a progressão tumoral do melanoma humano, utilizando o modelo de tumor xenográfico subcutâneo, em camundongos nude, e (ii) Avaliar o efeito da Monoetanolamina administrada por via oral durante 24 dias, sobre a morbidade, mortalidade e formação de úlceras tumorais, no modelo de tumor xenográfico subcutâneo, em camundongos nude.
FARMACOLOGIA DE SEGURANÇA DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL: AVALIAÇÃO DO POTENCIAL EFEITO NEUROTÓXICO DA FOSFOETANOLAMINA (USP – São Carlos)
O presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial efeito neurotóxico da Substância Teste Fosfoetanolamina Sintética produzida pela USP (São Carlos) em ratos
FARMACOLOGIA DE SEGURANÇA DO SISTEMA CARDIOVASCULAR: AVALIAÇÃO DO EFEITO DA FOSFOETANOLAMINA (USP – São Carlos) SOBRE PARÂMETROS HEMODINÂMICOS
O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da Fosfoetanolamina – USP (São Carlos) sobre a hemodinâmica do sistema cardiovascular em ratos através de diferentes metodologias:
• Parte I (in vivo) – Avaliar a pressão arterial e a frequência cardíaca em ratos conscientes;
• Parte II (ex vivo) – Avaliar a pressão intraventricular e suas derivadas através da técnica do coração isolado de rato (Langendorff).
AVALIAÇÃO DAS ATIVIDADES CITOTÓXICA E ANTIPROLIFERATIVA DA MISTURA DE FOSFOETANOLAMINA + MONOETANOLAMINA (100:70) EM LINHAGEM DE CÉLULAS HUMANAS DE CARCINOMA DE PULMÃO
O presente estudo teve como avaliar a citotoxicidade e antiproliferativa da Substância Teste (Fosfoetanolamina + Monoetanolamina – 100:70) na linhagem celular de carcinoma de pulmão, pelos métodos de MTT, vermelho neutro e Sulforrodamina B.